বিচ্ছিন্নতা পদ্ধতি
স্টেরয়েডগুলির বিচ্ছিন্নকরণের পদ্ধতিগুলি স্টেরয়েডগুলির রাসায়নিক প্রকৃতি এবং বিচ্ছিন্নকরণের স্কেল এবং উদ্দেশ্য অনুসারে পৃথক। জৈব দ্রাবকগুলির সাথে উত্তোলনের মাধ্যমে স্টেরয়েডগুলি প্রাকৃতিক উত্স থেকে পৃথক করা হয়, যার মধ্যে তারা সাধারণত টিস্যুগুলির জলীয় তরলগুলির চেয়ে বেশি সহজেই দ্রবীভূত হয়। উত্স উপাদান প্রায়শই একটি অ্যালকোহলযুক্ত দ্রাবক দিয়ে প্রাথমিকভাবে চিকিত্সা করা হয়, যা এটি ডিহাইড্রেট করে, স্টেরয়েডগুলির সাথে যুক্ত প্রোটিনকে অস্বীকার করে এবং বহু স্টেরয়েডগুলিকে দ্রবীভূত করে। সম্পূর্ণ টিস্যু বা অ্যালকোহল দ্বারা তাদের থেকে আহৃত পদার্থের সাপ্লোনাইফিকেশন স্টেরল এসটার, ট্রাইগ্লিসারাইডস এবং অন্যান্য ফ্যাটি এস্টারগুলির অণুগুলিকে বিভক্ত করে এবং জল-অদৃশ্য দ্রাবক যেমন হেক্সেন বা ইথারের মাধ্যমে স্টেরলগুলি নিষ্ক্রিয় করে যথেষ্ট পরিমাণে পরিশোধিত করে with । অক্ষত স্টেরল এস্টার বা হরমোনীয় স্টেরয়েড এবং তাদের বিপাক (জৈবিক রূপান্তর দ্বারা উত্পাদিত যৌগগুলি) যা শক্তিশালী অ্যাসিড বা ক্ষারগুলির সংবেদনশীল, তবে, বিচ্ছিন্নতার জন্য মূলত নিরপেক্ষ অবস্থার প্রয়োজন হয় এবং, যদিও মূত্রথলির স্টেরয়েডগুলির বিশ্লেষণের জন্য কিছু পদ্ধতিতে অ্যাসিড চিকিত্সা, মাইল্ডার হাইড্রোলাইসিস নিয়োগ করে এনজাইম দ্বারা, পছন্দ করা হয়। কিছু স্টেরয়েডের অম্লতা তাদের ক্ষারীয় দ্রবণে ধারণ করার অনুমতি দেয়, যখন ননাসিডিক অমেধ্যগুলি জৈব দ্রাবক দিয়ে বের করা হয়।
বাণিজ্যিকভাবে, প্রচুর স্টেরয়েডগুলি সাধারণত দ্রাবকগুলি থেকে বারবার স্ফটিক দ্বারা বিশুদ্ধ করা হয়। তদন্তকারী বা অ্যাসের উদ্দেশ্যে ছোট আকারের ল্যাবরেটরি বিচ্ছিন্নতা সাধারণত স্টেরয়েড এবং এর অমেধ্যগুলির পৃথক ধরণের পোলারিটিগুলি শোষণ করে, যা পোলারিটির মধ্যে পৃথক দ্রাবকগুলির মধ্যে বা ক্রোমাটোগ্রাফির মাধ্যমে বিভাজন করে পৃথক করা যায় (কাঠামোর নির্ধারণ এবং বিশ্লেষণের পদ্ধতিগুলি নীচে দেখুন)। কখনও কখনও, বিশেষ reagents পছন্দসই বৃষ্টিপাত বা অন্যথায় পছন্দসই স্টেরয়েড পৃথক করতে পারে। একটি ধ্রুপদী উদাহরণ হ'ল প্রাকৃতিক স্টেরয়েড ডেরাইভেটিভ ডিজিটোনিন দ্বারা কোলেস্টেরলের মতো 3β-হাইড্রোক্সি স্টেরলগুলির বৃষ্টিপাত। দুর্দান্ত শারীরবৃত্তীয় আগ্রহের নতুন স্টেরয়েডগুলি কেবলমাত্র চরম অসুবিধা দিয়ে টিস্যু থেকে বিচ্ছিন্ন হয়, কারণ তারা সাধারণত উপাদানগুলির সন্ধান করে। একটি উদাহরণে, 500 কেজি (1,100 পাউন্ড) রেশমকৃমি পিউপে 25 মিলিগ্রাম (0.0008 আউন্স) শুদ্ধ গলিত হরমোন, স্টেরয়েড একডিসোন (অর্থাত 20 × 10 6- গুণ বিশুদ্ধকরণ) পেয়েছিল। এই জাতীয় ক্ষেত্রে প্রতিটি বিচ্ছিন্ন পদক্ষেপটি প্রয়োজনীয় শারীরবৃত্তীয় ক্রিয়াকলাপের জন্য একটি ছাই অনুসরণ করে কাঙ্ক্ষিত উপাদানটি শুদ্ধ হচ্ছে কিনা তা নিশ্চিত করার জন্য। ছোট জৈবিক নমুনায় তাদের পার্সার সময় পরিচিত স্টেরয়েড হরমোনের শতকরা পুনরুদ্ধার সাধারণত প্রাথমিক নমুনায় তেজস্ক্রিয় আকারে একই স্টেরয়েডের একটি ট্রেস যুক্ত করে নির্ধারণ করা হয়, শুদ্ধ হওয়ার পরে রেডিওএসে (তেজস্ক্রিয়তার ভিত্তিতে বিশ্লেষণ) অনুসরণ করে। তেজস্ক্রিয় স্টেরয়েড পুনরুদ্ধারের দক্ষতা প্রাকৃতিক পদার্থের সমান বলে ধরে নেওয়া হয়।
কাঠামো এবং বিশ্লেষণের পদ্ধতিগুলি নির্ধারণ
নিয়মানুগ, স্টেরয়েড রিং সিস্টেম, গঠন প্রথম তদন্ত ব্যবহৃত রাসায়নিক পদ্ধতি দ্বারা ধাপে ধাপে ভাঙ্গন, ঐতিহাসিক আগ্রহের প্রধানত হয়। স্টেরয়েডগুলিতে পাওয়া বিভিন্ন সংখ্যক পারমাণবিক কাঠামো প্রায়শই পরিচিত কাঠামোর সাথে সম্পর্কিত যৌগগুলিতে রূপান্তর করে একটি নতুন স্টেরয়েডের কাঠামো স্থাপনের অনুমতি দেয়। জৈব রসায়নের সমস্ত অঞ্চলের মতো স্টেরয়েড ক্ষেত্রে কাঠামোর বর্ণনাই শারীরিক পদ্ধতিগুলিতে, বিশেষত পারমাণবিক চৌম্বকীয় অনুরণন, ইনফ্রারেড স্পেকট্রোস্কোপি, ভর স্পেকট্রোম্যাট্রি এবং এক্স-রে স্ফটিকলোগ্রাফির উপর নির্ভর করে। এই পদ্ধতিগুলির দ্বারা প্রাপ্ত ডেটা স্টেরয়েডগুলির বৈশিষ্ট্যগুলির শাস্ত্রীয় মানদণ্ডকে শক্তিশালী করে এবং প্রায়শই প্রতিস্থাপন করে: গলনাঙ্ক, অপটিকাল ঘূর্ণন, মৌলিক বিশ্লেষণ এবং একটি নির্দিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্যে অতিবেগুনী শোষণ।
ক্রোমাটোগ্রাফি স্টেরয়েড রসায়নের একটি গুরুত্বপূর্ণ কৌশল। নির্বাচিত ক্রোমাটোগ্রাফিক সিস্টেমে স্টেরয়েডের আচরণ প্রায়শই এটির উচ্চমাত্রার সম্ভাবনার সাথে চিহ্নিত করে। পরিবর্তে ক্রোমাটোগ্রাফিক পরীক্ষা করা হয় যে উপাদানটি ডেরিভেটিভগুলিতে রূপান্তর করে সনাক্তকরণটি কার্যত নির্দিষ্ট করা যেতে পারে। কাগজ ক্রোমাটোগ্রাফি, পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফি, তরল ক্রোমাটোগ্রাফি এবং গ্যাস-তরল ক্রোমাটোগ্রাফিতে স্টেরয়েডগুলির আচরণের জন্য প্রচুর উপাত্ত দেখায় যে আণবিক কাঠামোর স্বতন্ত্র বৈশিষ্ট্যগুলি স্টেরয়েডগুলির ক্রোমাটোগ্রাফিক বৈশিষ্ট্যগুলি অনুমানযোগ্য পদ্ধতিতে নির্ধারণ করে। গণ স্পেকট্রোমিটারের সাথে সরাসরি সংযুক্ত গ্যাস-তরল ক্রোমাটোগ্রাফ বা তরল ক্রোমাটোগ্রাফ স্টেরয়েডের একটি মাইক্রোগ্রামের চেয়ে কম সংখ্যক নমুনা ব্যবহার করে একসাথে বৈশিষ্ট্যযুক্ত ভর-বর্ণালী খণ্ডিত প্যাটার্নগুলি এবং সমালোচনামূলক গ্যাস-তরল ক্রোমাটোগ্রাফিক ডেটা অনুমতি দেয়। রক্ত এবং প্রস্রাবের মতো শরীরের তরল পদার্থের নির্যাসগুলিতে স্টেরয়েডগুলির কাঠামোগত বিশ্লেষণে এই শক্তিশালী কৌশলটি ক্রমবর্ধমান গুরুত্বের সাথে।
স্টেরয়েডগুলির মোট সংশ্লেষণ
স্টেরয়েডগুলির মোট সংশ্লেষগুলিতে, কুইনোন হিসাবে একটি মনোসাইক্লিক সূচনা উপাদান একটি রিং সরবরাহ করে যার উপরে নিউক্লিয়াসের অন্যান্য রিংগুলি ক্রমাগত রিং ফিউশনগুলিতে কাঙ্ক্ষিত স্টেরিওকেমিস্ট্রি দেওয়ার জন্য ছোট অণুগুলির সাথে ঘন ঘন প্রতিক্রিয়া দ্বারা ধাপে ধাপে বিশদভাবে ব্যাখ্যা করা হয়। প্রতিটি নতুন রিং ক্লোজার অবশ্যই কার্যকরী গোষ্ঠী সরবরাহ করতে হবে যা পরবর্তী রিংটি তৈরিতে ব্যবহৃত হতে পারে। একেবারে ভিন্ন পদ্ধতিতে, রিং ফিউশনগুলির স্টেরিওকেমিক্যাল কন্ট্রোলটি এই সত্যটি ব্যবহার করে অর্জন করা হয় যে অম্লীয় অবস্থার অধীনে যথাযথভাবে অবস্থিত ডাবল বন্ড সমন্বিত ওপেন-চেইন অণুগুলি প্রয়োজনীয় স্টেরিওকেমিস্ট্রিযুক্ত বহুবিধ কাঠামোয় ঘূর্ণায়মান হয় এবং এটি তুলনামূলকভাবে সহজেই স্টেরয়েডে রূপান্তরিত হতে পারে। কোলেস্টেরলের জৈব সংশ্লেষণে স্কোলোইন ২,৩-অক্সাইডের ল্যানোস্টেরল থেকে সাইক্লাইজেশনের সাথে এর সাদৃশ্য থেকে (জৈব সংশ্লেষের নীচে দেখুন এবং স্টেরয়েডগুলির বিপাক: কোলেস্টেরল), এই পদ্ধতিতে জৈব জিনগত ধরণের চক্রের জড়িত থাকার কথা বলা হয়।
