ক্লোনটি বিচ্ছিন্ন করা হচ্ছে
সাধারণভাবে, কোনও নির্দিষ্ট জিনের ক্লোন বা আগ্রহের ডিএনএ সিকোয়েন্স পেতে ক্লোনিং করা হয়। ক্লোন করার পরে পরবর্তী পদক্ষেপটি, লাইব্রেরির অন্যান্য সদস্যদের মধ্যে সেই ক্লোনটি সন্ধান এবং বিচ্ছিন্ন করা। লাইব্রেরি যদি কোনও জীবের পুরো জিনোমকে অন্তর্ভুক্ত করে তবে কোথাও library গ্রন্থাগারের মধ্যে কাঙ্ক্ষিত ক্লোন হবে। এটি সম্পর্কিত বিভিন্ন উপায় রয়েছে যা সম্পর্কিত নির্দিষ্ট জিনের উপর নির্ভর করে। সর্বাধিক সাধারণভাবে, ক্লোনড ডিএনএ বিভাগ যা চাওয়া জিনকে হোমোলজি দেখায় তা তদন্ত হিসাবে ব্যবহৃত হয়। উদাহরণস্বরূপ, যদি একটি মাউস জিন ইতিমধ্যে ক্লোন করা হয়ে থাকে, তবে সেই ক্লোনটি মানব জিনোম লাইব্রেরি থেকে সমমানের মানব ক্লোনটি সন্ধান করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। লাইব্রেরি গঠনকারী ব্যাকটিরিয়া উপনিবেশগুলি পেট্রি খাবারের সংকলনে উত্থিত হয়। তারপরে প্রতিটি প্লেটের পৃষ্ঠের উপরে একটি ছিদ্রযুক্ত ঝিল্লি স্থাপন করা হয় এবং কোষগুলি ঝিল্লিটিতে মেনে চলে। কোষগুলি ফেটে গেছে, এবং ডিএনএ একক স্ট্র্যান্ডে পৃথক করা হয়েছে — সবগুলি ঝিল্লিতে। প্রোবটি একক স্ট্র্যান্ডেও পৃথক করা হয় এবং প্রায়শই তেজস্ক্রিয় ফসফরাস সহ লেবেলযুক্ত হয়। তেজস্ক্রিয় তদন্তের একটি সমাধান ঝিল্লি স্নানের জন্য ব্যবহৃত হয়। একক আটকে থাকা প্রোব ডিএনএ কেবলমাত্র ক্লোনটির ডিএনএতে মেনে চলবে যার সমতুল্য জিন থাকে। ঝিল্লিটি শুকনো হয়ে রেডিয়েশন-সংবেদনশীল ফিল্মের শীটের বিপরীতে স্থাপন করা হয় এবং কোথাও ছায়াছবিগুলিতে একটি কালো দাগ দেখা যায়, কাঙ্ক্ষিত ক্লোনটির উপস্থিতি এবং অবস্থান ঘোষণা করে। ক্লোনটি তারপরে মূল পেট্রি থালা থেকে পুনরুদ্ধার করা যেতে পারে।
জিনেটিক্স: রিকম্বিন্যান্ট ডিএনএ প্রযুক্তি এবং পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া
জেনেটিক বোঝার অগ্রযাত্রায় প্রযুক্তিগত অগ্রগতি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করেছে। ১৯ 1970০ সালে আমেরিকান জীবাণুবিজ্ঞানী ড্যানিয়েল নাথানস
ডিএনএ সিকোয়েন্সিং
একবার ডিএনএর একটি অংশকে ক্লোন করা হয়ে গেলে, এর নিউক্লিয়োটাইড ক্রম নির্ধারণ করা যায়। নিউক্লিওটাইড ক্রমটি জিন বা জিনোমের জ্ঞানের সবচেয়ে মৌলিক স্তর। এটি এমন একটি নীলনকশা যা জীব গঠনের জন্য নির্দেশাবলী ধারণ করে এবং জেনেটিক ক্রিয়াকলাপ বা বিবর্তন সম্পর্কে কোনও তথ্য এই তথ্য প্রাপ্ত না করেই সম্পূর্ণ হতে পারে না।
ব্যবহারসমূহ
ডিএনএ বিভাগের ক্রম সম্পর্কে জ্ঞানের অনেকগুলি ব্যবহার রয়েছে এবং কয়েকটি উদাহরণ অনুসরণ করে। প্রথমত, এটি জিন, ডিএনএর অংশগুলি নির্দিষ্ট প্রোটিন বা ফেনোটাইপের কোড খুঁজে পেতে ব্যবহার করা যেতে পারে। যদি ডিএনএর একটি অঞ্চলটি ধারাবাহিকভাবে করা থাকে তবে এটি জিনের বৈশিষ্ট্যযুক্ত বৈশিষ্ট্যের জন্য প্রদর্শিত হতে পারে। উদাহরণস্বরূপ, ওপেন রিডিং ফ্রেম (ওআরএফ) - দীর্ঘ সিকোয়েন্সগুলি যা একটি স্টার্ট কোডন দিয়ে শুরু হয় (তিনটি সংলগ্ন নিউক্লিওটাইডস; একটি কোডনের ক্রম অ্যামিনো অ্যাসিড উত্পাদন নির্দেশ করে) এবং স্টপ কোডনগুলি দ্বারা নিরবচ্ছিন্ন হয় (তাদের সমাপ্তির ব্যতীত অন্য একটি) - সুপারিশ এ প্রোটিন কোডিং অঞ্চল। এছাড়াও, মানব জিনগুলি সাধারণত তথাকথিত সিপিজি দ্বীপপুঞ্জের সাথে সংলগ্ন cy সাইটোসিন এবং গুয়ানিনের ক্লাস্টার, দুটি নিউক্লিয়োটাইড যা ডিএনএ তৈরি করে। যদি জানা ফেনোটাইপযুক্ত জিন (যেমন মানুষের মধ্যে একটি রোগ জিন) ক্রোমোসোমাল অঞ্চলের ক্রম অনুসারে পরিচিত হয়, তবে এই অঞ্চলে অপসাইনযুক্ত জিনগুলি সেই ফাংশনের প্রার্থী হয়ে উঠবে। দ্বিতীয়ত, বিভিন্ন জীবের হোমোলজাস ডিএনএ সিকোয়েন্সগুলির সাথে প্রজাতির মধ্যে এবং উভয়ের মধ্যে বিবর্তনমূলক সম্পর্ক স্থাপনের জন্য তুলনা করা যেতে পারে। তৃতীয়ত, একটি জিন ক্রম ক্রিয়ামূলক অঞ্চলগুলির জন্য প্রদর্শিত হতে পারে। জিনের কার্যকারিতা নির্ধারণের জন্য, বিভিন্ন ডোমেন সনাক্ত করা যায় যা অনুরূপ ফাংশনের প্রোটিনগুলির মধ্যে সাধারণ। উদাহরণস্বরূপ, জিনের মধ্যে নির্দিষ্ট অ্যামিনো অ্যাসিডের ক্রমগুলি সর্বদা প্রোটিনে পাওয়া যায় যা কোষের ঝিল্লি বিস্তৃত হয়; যেমন অ্যামিনো অ্যাসিড প্রসারিত ট্রান্সমেম্ব্রেন ডোমেন বলা হয়। যদি কোনও ট্রান্সমেম্ব্রন ডোমেন অজানা ফাংশনের জিনে পাওয়া যায় তবে এটি প্রস্তাব দেয় যে এনকোডযুক্ত প্রোটিন সেলুলার ঝিল্লিতে রয়েছে। অন্যান্য ডোমেনগুলি ডিএনএ-বাইন্ডিং প্রোটিনকে চিহ্নিত করে। যে কোনও আগ্রহী ব্যক্তি বিশ্লেষণের জন্য ডিএনএ সিকোয়েন্সের বেশ কয়েকটি পাবলিক ডাটাবেস উপলব্ধ।
